準(zhǔn)備工作

    1、采精員一手帶雙層手套，另一手持37℃保溫杯(內(nèi)裝1次性食品袋)用于收集精液；　　

    2、飼養(yǎng)員將待采精的公豬趕至采精欄，用0.1%高錳酸（如果不好掌握濃度，可以用聚維酮碘溶液）清洗其腹部和包皮，再用溫水（夏天用自來水）清洗干凈，避免藥物殘留對精子的傷害；　　

    3、采精員擠出公豬包皮積尿，按摩公豬包皮部，刺激其爬跨假豬臺(tái)；　　

    4、公豬爬跨假豬臺(tái)并逐步伸出陰莖，脫去外層手套，將公豬陰莖龜頭導(dǎo)入空拳；　　

    5、用手（大拇指與龜頭相反方向）緊握伸出的公豬陰莖螺旋狀龜頭，順其向前沖力將陰莖的“s’’狀彎曲拉直，握緊陰莖龜頭防止其旋轉(zhuǎn)，公豬即可射精；　　

    6、用四層沙布過濾（二收集濃份精液于保溫杯內(nèi)的一次性食品袋內(nèi)，最初射出的少量精液含精子很少，可以不必接取，有些公豬分2-3個(gè)階段將濃份精液射出，直到公豬射精完畢，射精過程歷時(shí)5-7分鐘；　　

    7、采精員應(yīng)注意安全，一旦公豬出現(xiàn)攻擊行為，采精員應(yīng)立刻逃至安全角；　　

    8、下班之前徹底清洗采精欄；　　

    9、采精期間不準(zhǔn)毆打公豬，防止出現(xiàn)性抑制；　

    10、采精頻率：成年公豬每周2次，青年公豬（1歲左右）每周1次。最好固定每頭公豬的采精頻率；　　        11、公豬采精調(diào)教：①后備公豬7月齡開始進(jìn)行采精調(diào)教；②每次調(diào)教時(shí)間不超過15分鐘；③一旦采精獲得成功，分別在第2、3天再采精1次，進(jìn)行鞏固掌握該技術(shù)；④采精調(diào)教可采用發(fā)情母豬誘導(dǎo)、觀摩有經(jīng)驗(yàn)公豬采精、以發(fā)情母豬分泌物刺激等方法；⑤調(diào)教公豬要有耐心，不準(zhǔn)打罵公豬；⑥注意公豬和調(diào)教人員的安全。

    稀釋液配制操作規(guī)程

    1、配制稀釋液的藥品要求選用分析純試劑，對含有結(jié)晶水的試劑要按摩爾濃度進(jìn)行換算（如含水葡萄糖和無水葡萄糖）；　　

    2、按稀釋液配方，用稱量紙、電子天平準(zhǔn)確稱量藥品；　　

    3、按1000ml、2000ml劑量稱量稀釋粉，置于密封袋中；　　

    4、使用前將稱量好的稀釋粉溶于定量的雙蒸水中，可用磁力攪拌器助其溶解；　　

    5、用濾紙過濾，以盡可能除去雜質(zhì)；　　

    6、用1ml稀鹽酸或1ml氫氧化鈉調(diào)整稀釋液的ph值為7.2(6.8-7.4)左右,滲透壓為330mosm；稀釋液配好，應(yīng)及時(shí)貼上標(biāo)簽，標(biāo)明品名、配制日期和時(shí)間、經(jīng)手人等；　　

    7、要認(rèn)真檢查已配制好的稀釋液成品，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)糾正；　

    8、液態(tài)狀稀釋液冰箱4℃保存，不超過24小時(shí)，超過有效貯存期的變質(zhì)稀釋液應(yīng)廢棄。

    精液質(zhì)量的檢查操作規(guī)程

     1、精液量：以電子天平稱量精液，按每克1毫升計(jì)，避免以量筒等轉(zhuǎn)移精液盛放容器的方法測量精液體積；　　    2、顏色：正常的精液是乳白色或淺灰白，精子密度越高，色澤愈濃，其透明度愈低。如帶有綠色或黃色是混有膿液或尿液，若帶有淡紅色或紅褐色是含有血液。這樣的精液應(yīng)舍棄不用，會(huì)同獸醫(yī)尋找原因；　

　3、氣味：豬精液略帶腥味，如有異常氣味，應(yīng)廢棄；　　

    4、ph值（酸堿度）：以ph計(jì)測量（ph計(jì)使用見說明書）；　　

    5、精子活率檢查：活率是指呈直線運(yùn)動(dòng)的精子百分率，在顯微鏡下觀察精子活率，一般按0.1-1.0 的十級(jí)評分法進(jìn)行，鮮精活率要求不低于0.7;　

    6、精子密度：指每毫升精液中所含的精子數(shù)，是確定稀釋倍數(shù)的重要指針。要求用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)或精液密度儀測定。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)方法：①以微量加樣品取具有代表性原精液100μl，3%nac  l900μl,混勻，使之稀釋10倍；②在血細(xì)胞計(jì)數(shù)室上放一蓋玻片，取1滴上述精液放入計(jì)數(shù)板的槽中，靠虹吸將精液吸入計(jì)數(shù)室內(nèi)；③在高倍鏡下計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子總數(shù)，將該數(shù)乘以50萬，即得原精液每毫升的精子數(shù)（即精液密度）。精液密度儀使用見其說明書；　　

    7、精子畸形率：畸形率是指異常精子的百分率，一般要求畸形率不超過18％，其測定可用普通顯微鏡,但需伊紅或姬姆沙染色,相差顯微鏡可直接觀察活精子的畸形率,公豬使用過頻或高溫環(huán)境會(huì)出現(xiàn)精子尾部帶有原生質(zhì)滴的畸形精子;畸形精子種類很多,如:巨型精子、短小精子、雙頭或雙尾精子，頂體膨脹或脫落、精子頭部殘缺或與尾部分離、尾部變曲。要求每頭公豬每兩周檢查一次精子畸形率；　

    8、按要求做好精液質(zhì)量檢查登記表；　　

    9、實(shí)事求是地填寫種公豬健康狀況登記表，從而真實(shí)地反應(yīng)種公豬健康狀況。

    精液的稀釋操作規(guī)程

    1、精液采集后應(yīng)盡快稀釋，原精貯存不超過30分鐘；　　

    2、未經(jīng)質(zhì)量檢查或檢查不合格（活力0.7以下）的精液不能稀釋；　　

    3、稀釋液與精液要求等溫稀釋,兩者溫差不超過1℃,即稀釋液應(yīng)加熱至33℃-37℃,以精液溫度為標(biāo)準(zhǔn),來調(diào)節(jié)稀釋液的溫度,絕不能反過來操作；　　

    4、稀釋時(shí),將稀釋液沿盛精液的杯(瓶)壁緩慢加入到精液中,然后輕輕搖動(dòng)或用消毒玻璃棒攪拌,使之混合均勻；　　

    5、如作高倍稀釋時(shí),應(yīng)進(jìn)行低倍稀釋（1：1-2）,稍待片刻后再將余下的稀釋液沿壁緩慢加入,以防造成“稀釋打擊”；　

    6、稀釋倍數(shù)的確定：活率≥0.7的精液,一般按每個(gè)輸精劑量含40億個(gè)總精子,輸精量為80-90ml確定稀釋倍數(shù),例如：某頭公豬一次采精量是200ml  ,活力為0.8,密度為2億/ml,要求每個(gè)輸精劑量是含40億精子,輸精量為80ml,則總精子數(shù)為200ml×2億/ml=400億,輸精頭份為400億÷40億=10份，加入稀釋液的量為10×80ml-200ml=600ml；　

    7、稀釋后要求靜置片刻再作精子活力檢查,如果稀釋前后活力一樣,即可進(jìn)行分裝與保存,如果活力下降,說明稀釋液的配制或稀釋操作有問題,不宜使用,并應(yīng)查明原因加以改進(jìn)；　　

    8、不準(zhǔn)隨便更改各種稀釋液配方的成分及其相互比例,也不準(zhǔn)幾種不同配方稀釋液隨意混合使用；　

　9、稀釋液的配方見附表。

    精液的常溫保存的操作規(guī)程

    1、精液稀釋后，檢查精液活率，若無明顯下降，按每頭份80-90 ml分裝；　　

    2、瓶上加蓋密封，并在輸精瓶上寫清楚公豬的品種、耳號(hào)，采精日期（月、日、時(shí)）；　　

    3、置22℃-25℃的室溫1小時(shí)后(或用幾層毛巾包被好后)直接放置17℃冰箱中；　　

    4、保存過程中要求每12小時(shí)將精液混勻一次,防止精子沉淀而引起死亡；　　

    5、每天檢查精液保存箱溫度并進(jìn)行記錄，若出現(xiàn)停電應(yīng)全面檢查貯存的精液質(zhì)量；　　

    6、盡量減少保存精液保存箱關(guān)開次數(shù),以免造成對精子的打擊而死亡。

    發(fā)情鑒定技術(shù)的操作規(guī)程

    1、母豬發(fā)情周期平均21天（19--23天），大多數(shù)經(jīng)產(chǎn)母豬一般在仔豬斷奶后的一周內(nèi)（3--7天），可再次發(fā)情排卵，配種受胎；　　

    2、母豬發(fā)情周期可分為發(fā)情前期、發(fā)情期、發(fā)情后期和間情期，母豬只有在發(fā)情才允許公豬爬跨或稱之為站立反應(yīng)，此性行為表現(xiàn)可作為母豬適時(shí)輸精的指標(biāo)；　　

    3、各期特征，略述如下：①發(fā)情前期：母豬舉動(dòng)不安，外陰腫脹，并由淡黃色變?yōu)榧t色這種變化在后備母豬較為明顯；陰道有粘液分泌，其粘度漸漸增加。在此期母豬不允許人騎在背上，平均可有2.7天，不宜輸精配種。②發(fā)情期：平均約2.5天，特征為母豬陰部腫脹及紅色開始減退，分泌物也變濃厚，粘度增加。此時(shí)母豬允許壓背而不動(dòng)，壓背時(shí)，母豬雙耳豎起向后，后肢緊繃。③發(fā)情后期：1-2天,發(fā)情母豬的陰部完全回復(fù)正常，不允許公豬爬跨；④間情期:13-14天,完全恢復(fù)正常狀態(tài);　　

    4、發(fā)情鑒定：每日最少要做兩次試情（每天上午6：30-8：30和下午16：00-17：30進(jìn)行發(fā)情檢查），即在安靜的環(huán)境下，有公豬在旁時(shí)，壓背，以觀察其站立反應(yīng)。試情公豬一般選用善于交談、唾液分泌旺盛、行動(dòng)緩慢的老公豬；　　

    5、作好發(fā)情檢查的完整記錄：包括發(fā)情母豬耳號(hào)、胎次、發(fā)情時(shí)間、外陰部變化、壓背反應(yīng)等，尤其是后備母豬的記錄。

    輸精操作規(guī)程

    1、輸精次數(shù)：①第1次自然交配、第2、3次人工授精；②2次人工授精；③3次人工授精；　　

    2、輸精時(shí)間：①斷奶后3-6天發(fā)情的經(jīng)產(chǎn)母豬，發(fā)情出現(xiàn)站立反應(yīng)后6-12小時(shí)進(jìn)行第1次輸精配種；②后備母豬和斷奶后7天以上發(fā)情的經(jīng)產(chǎn)母豬，發(fā)情出現(xiàn)站立反應(yīng)，就進(jìn)行配種（輸精）；　　

    3、精液檢查：從17℃保存箱取出的精液,輕輕搖勻,用已滅菌的滴管取1滴放于預(yù)熱的載玻片,置于37℃的恒溫板上片刻,用顯微鏡檢查活力，精液活力≥0.7，才可進(jìn)行輸精；　　

    4、將試情公豬趕至待配母豬欄之前，使母豬在輸精時(shí)與公豬口鼻部接觸；　　

    5、輸精人員消毒清潔雙手；　　

    6、用0.1％高錳酸鉀水溶液清潔母豬外陰、尾根及臀部周圍,再用溫水浸濕毛巾，擦干外陰部；　　

    7、從密封袋中取出沒受任何污染的一次性輸精管（手不應(yīng)接觸輸精管前2/3部分），在其前端涂上精液作為潤滑液；　　

    8、將輸精管45度角向上插入母豬生殖道內(nèi)，輸精管進(jìn)入3-4cm之后，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，當(dāng)感覺有阻力時(shí)，繼續(xù)緩慢旋轉(zhuǎn)同時(shí)前后移動(dòng)，直到感覺輸精管前端被鎖定（輕輕回拉不動(dòng)），并且確認(rèn)真正被子宮頸鎖定；　　

    9、從精液貯存箱取出質(zhì)量合格的精液，確認(rèn)公豬品種、耳號(hào)；　　

    10、緩慢顛倒搖均精液，用剪刀剪去瓶嘴，接到輸精管上，開始進(jìn)行輸精；　　

    11、用針頭在輸精瓶底部扎一個(gè)小孔，撫摸母豬的乳房或外陰、壓背刺激母豬，使其子宮收縮產(chǎn)生負(fù)壓，將精液吸納；輸精時(shí)勿將精液擠入母豬生殖道內(nèi)，防止精液倒流；　　

    12、控制輸精瓶的高低來調(diào)節(jié)輸精時(shí)間，輸精時(shí)間要求3-5分鐘，輸完一頭母豬后，應(yīng)在防止空氣進(jìn)入母豬生殖道的情況下，把輸精管后端一小段折起，放在輸精瓶中，使其滯留在生殖道內(nèi)3-5分鐘，讓輸精管慢慢滑落；　　

    13、從17℃精液保存箱中取出的精液，無需升溫至37℃,搖勻后可直接輸精,但檢查精液活力需將玻片預(yù)熱至37℃；　　

    14、經(jīng)產(chǎn)母豬用一次性海綿頭輸精管，輸精前檢查海綿頭是否松動(dòng)；后備母豬用一次性螺旋頭輸精管。為防止子宮炎發(fā)生，每頭母豬每次輸精都應(yīng)使用一條新的輸精管；　　

    15、每頭母豬在一個(gè)發(fā)情期內(nèi)要求至少輸精兩次，最好三次，兩次輸精時(shí)間間隔8小時(shí)左右；　　

    16、認(rèn)真登記母豬生產(chǎn)卡、配種記錄。